尊龙凯时人生就博开发的本试剂盒仅限于科学研究使用,禁止用于医学诊断。以下是关于人巨噬细胞炎性蛋白5 (MIP-5) Elisa试剂盒的使用说明。
检测原理
该试剂盒采用双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先涂覆有adropin(AD)抗体的微孔中依次加入样本、标准品和HRP标记的检测抗体,经过温育后进行彻底洗涤。通过底物TMB显色反应,在过氧化物酶的作用下,TMB由蓝色转变为最终的黄色,颜色深浅与样品中的adropin(AD)浓度成正相关。利用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),以此计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热源和内毒素的试管,操作中需避免任何细胞刺激。血液收集后,3000转离心10分钟,以快速小心分离血清与红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸或肝素作为抗凝剂,3000转离心30分钟后取上清。
3. 细胞上清液:同样以3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:组织需与适量生理盐水混合,捣碎后,3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:若样本未能及时检测,请按一次性用量分装并在-20℃下冷冻保存,避免反复冻融。在室温下解冻时务必确保样品完全均匀解冻。
操作注意事项
本试剂盒组件中,标准品(S0-S5)的浓度依次为:0、25、50、100、200和400 pg/mL。
试剂的准备
对于20×洗涤缓冲液,需按1:20的比例使用蒸馏水稀释,具体为1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
结果判断及绘制标准曲线
在Excel表格中,以标准品浓度为横坐标,相应的OD值为纵坐标,绘制标准品的线性回归曲线,利用曲线方程计算各样本的浓度值。
尊龙凯时人生就博特此声明,本试剂盒的性能和适用性仅限于科研用途,用户需遵循相关实验规程进行实验。