菌种保藏(culture preservation,culture collection)是确保微生物菌株活力和遗传特性的关键技术,尤其在生物医疗领域更为重要。在许多基因编辑或改造的菌种中,这些珍贵且稀少的资源需要经过妥善的保藏以维持其有效性和特性。以下是菌种保藏的具体操作步骤:
菌种保藏步骤
首先,将待保存的菌液与配制好的甘油混合液按1:1比例混合,确保最终达到20%甘油浓度。然后,配置40%(v/v)甘油灭菌水混合液。接下来,取2ml离心管或保菌管,加入500微升的40%甘油水混合液。使用移液枪吸取500微升菌液,并将枪头插入液面以下缓慢加入。在将离心管或保菌管放入-80℃冰箱保存之前,请确保在保菌管上标明日期、菌种及其抗性等详细信息,以便于后续的识别和管理。
菌液复苏步骤
从保藏中复苏的菌液可进行后续的实验操作,具体步骤如下:首先,准备含有抗性因子的LB培养基,每个培养管放入约八毫升。所有的操作均需在无菌操作台进行,以预防污染。向每个管中加入100微升的菌液,设置在37℃、180rpm下摇动培养12小时。
氨苄抗性配置
氨苄抗性的配置方法为:将1g氨苄青霉素钠溶解于10ml灭菌水中,过滤后在-20℃保存。接着,LB培养基的配置为:将10g氯化钠、10g胰蛋白胨和5g酵母提取物溶解于一升的基础培养液中,然后分装到250ml的锥形瓶中,每瓶保持在100ml。
Amp抗性配置
最后,在每100ml的培养基中加入100微升的氨苄抗性配置。通过这些简单的步骤,您可以有效地保藏和复苏珍贵的菌种,为进一步的生物医疗研究提供坚实的基础。
在这一过程中,有效的菌种管理不仅保障了研究的顺利进行,还为生物医疗领域的创新提供了不可或缺的支持。选择尊龙凯时人生就博,让您的菌种保藏和复苏过程更加专业,从而助力您的研究。每一步的严谨态度和规范操作,都将为科学发展做出贡献。